TwitterLinkedinWhatsAppTelegramTelegram
0
Czytaj ten artykuł w:

Diagnostyka laboratoryjna: Mycoplasma hyopneumoniae

Jakimi metodami diagnostyki laboratoryjnej mogę zdiagnozować M. hyo? Którą wybrać w zależności od sytuacji? Jak interpretować wyniki?

Dostępne testy:

Zmiany makroskopowe

  • Kontrola wzrokowa zmian w płucach
Ryc. 1. Zdjęcie przedstawiające klasyczne zmiany w części doczaszkowo- brzusznej związane z Mycoplasma hyopneumoniae (niediagnostyczne) i wieloma różnymi infekcjami bakteryjnymi, a także niektórymi infekcjami wirusem grypy A.

Ryc. 1. Zdjęcie przedstawiające klasyczne zmiany w części doczaszkowo- brzusznej związane z Mycoplasma hyopneumoniae (niediagnostyczne) i wieloma różnymi infekcjami bakteryjnymi, a także niektórymi infekcjami wirusem grypy A.

  • Zalety:
    • Łatwe do wykonania
    • Można ocenić późne infekcje u świń wysyłanych do uboju
  • Wady:
    • Niediagnostyczny/patognomoniczny; wiele innych możliwych przyczyn
    • Wymaga innego potwierdzenia diagnostycznego

Hodowla bakteryjna

  • Izolacja żywego organizmu z tkanek ze zmianami chorobowymi lub z popłuczyn oskrzelowych
  • Typy próbek: płuca lub popłuczyny oskrzelowe
  • Zalety:
    • Tradycyjny złoty standard
    • Świnie mogą mieć wynik dodatni przez 7-8 miesięcy (długi okres kolonizacji)
  • Wady:
    • Wymagane specjalne podłoże (podłoże Friis)
    • Dostępna w niewielu laboratoriach
    • Droga
    • Bardzo trudny w hodowli (wiele fałszywie negatywnych wyników)

Immunohistochemia (IHC)

  • Wykrywa obecność antygenu bakteryjnego
  • Typy próbek: tkanka płuc
  • Zalety:
    • Wykrywa bakterie w miejscu zmiany (dowód na bycie przyczyną zmiany)
    • Świnie mogą mieć wynik dodatni przez 7-8 miesięcy (długi okres kolonizacji)
  • Wady:
    • Należy dostarczyć prawidłową próbkę tkanki – tkanka płuc musi zawierać przekrój dróg oddechowych (komórki nabłonka oskrzeli)
    • Wymaga obecności znacznie większej liczby bakterii niż PCR
    • Ocena tylko małej próbki tkanek
Ryc. 2. Dobra próbka tkanki płucnej do badania histopatologicznego wykazująca obecność dróg oddechowych (białe okrągłe kółka) na przekroju.

Ryc. 2. Dobra próbka tkanki płucnej do badania histopatologicznego wykazująca obecność dróg oddechowych (białe okrągłe kółka) na przekroju.

Przeciwciało fluorescencyjne (FA)

  • Wykrywa obecność antygenu bakteryjnego
  • Typy próbek: tkanka płuc
  • Zalety:
    • Wykrywa bakterie w miejscu zmiany (dowód na bycie przyczyną zmiany)
    • Świnie mogą mieć wynik dodatni przez 7-8 miesięcy (długi okres kolonizacji)
  • Wady:
    • Należy dostarczyć prawidłową próbkę tkanki – tkanka płuc musi zawierać przekrój dróg oddechowych (komórki nabłonka oskrzeli). Zobacz: ryc. 2 powyżej.
    • Wymaga obecności znacznie większej liczby bakterii niż PCR
    • Ocena tylko małej próbki tkanek

Reakcja łańcuchowa polimerazy (PCR)

  • Wykrywa obecność określonej sekwencji bakteryjnego kwasu nukleinowego (DNA)
  • Typy próbek: płuca, wymazy (nosowe, krtaniowe, tchawiczo-oskrzelowe lub oskrzelowe) lub popłuczyny z oskrzeli
  • Zalety:
    • Bardzo wysoka czułość (może wykryć niewielkie ilości bakterii)
    • Można łączyć próbki aby zwiększyć czułość diagnostyczną podczas diagnostyki stada
    • Świnie mogą mieć wynik dodatni przez 7-8 miesięcy (długi okres kolonizacji)
    • Średni koszt
  • Wady:
    • Nie jest dowodem na chorobę
    • Płyn ustny nie jest zbyt dobrą próbką (wiele wyników fałszywie ujemnych)

Tabela 1: Schematyczne zestawienie wyników badań naukowych i wyników terenowych dotyczących czułości różnych typów próbek w testach PCR na Mycoplasma hyopneumoniae.

Względna czułość Łączenie próbek*
Płyn ustny - Nie
Wymaz z nosa + Różnie
Wymaz krtaniowy ++ Korzystne
Wymaz tchawiczo-oskrzelowy ++ Korzystne
Wymaz oskrzelowy +++ Korzystne
Popłuczyny z drzewa oskrz. ++ Nie
Tkanka płucna ++++ Tak

* Łączenie próbek może być korzystne dla zwiększenia wrażliwości diagnostycznej podczas diagnozowania stada; nie dla diagnozy indywidualnych zwierząt

Test immunoenzymatyczny (ELISA)

  • Wykrywa obecność przeciwciał
  • Rodzaje próbek: surowica
  • Zalety:
    • ​​​​Może być stosowany w przypadkach przewlekłych.
    • Zwierzęta pozostają dodatnie przez wiele miesięcy.
  • Wady:
    • Wykryte specyficzne przeciwciała i czas wykrycia mogą się znacznie różnić w różnych dostępnych na rynku zestawach
    • Nie można odróżnić przeciwciał matczynych od tych po ekspozycji na patogen
    • Poziomy przeciwciał nie korelują z ochroną
    • Szczepienie nie wywołuje serokonwersji (w dużym stopniu zależy od szczepionki i użytego testu)
    • Wiele zarażonych świń nie ulega serokonwersji
    • Przeciwciała nie zawsze są wykrywane przez cały czas trwania infekcji
    • Pewna reaktywność krzyżowa z innymi mykoplazmami, zwłaszcza M. flocculare, która jest niepatogenna i często występuje u świń

Interpretacja wyniku:

Zmiany makroskopowe:

  • Dodatni: zmiany makroskopowe płuc mogą służyć jako jedna z możliwości diagnozy
  • Ujemny: wczesne przypadki zwykle nie objawiają się rozległymi zmianami w płucach

Hodowla bakteryjna:

  • Dodatni: potwierdzenie choroby
  • Ujemny: ujemny, bakterie mogły zostać nie wyhodowane, jeśli badanie nastąpi zbyt późno po zakażeniu lub po leczeniu antybiotykami lub po prostu niezdolne do wzrostu z powodu przerostu innych bakterii (obecne, ale bardzo trudne do hodowli)

IHC

  • Dodatni: bakterie obecne w miejscu zmian
  • Ujemny: ujemny lub bakterie mogły zostać pominięte, jeśli badanie nastąpi zbyt późno po zakażeniu lub po leczeniu antybiotykami

FA

  • Dodatni: bakterie obecne w miejscu zmian
  • Ujemny: ujemny lub bakterie mogły zostać pominięte, jeśli badanie nastąpi zbyt późno po zakażeniu lub po leczeniu antybiotykami

PCR

  • Dodatni: bakterie obecne, nie potwierdza jednak choroby
  • Ujemny: ujemny lub bakterie mogły zostać pominięte, jeśli badanie nastąpi zbyt późno po zakażeniu lub po leczeniu antybiotykami

ELISA

  • Dodatni: przeciwciała matczyne lub wcześniejsza ekspozycja (zwykle 3 do 8 tygodni po ekspozycji) na szczepionkę lub bakterie typu dzikiego
  • Ujemny: ujemny lub infekcja nie stymulująca serokonwersji lub zbyt wczesna do wykrycia (zwykle trwa od 3 do 8 tygodni po ekspozycji)

Możliwe scenariusze

Tuczniki z przewlekłym kaszlem:

  • Sekcja 1-3 niedawno padłych świń lub eutanazja świń kaszlących. Dogłębnie oceń płuca pod kątem zmian w części brzusznej doczaszkowej. Należy pobrać wiele kawałków płuc (upewniając się, że próbka zawiera drogi oddechowe) i umieścić w formalinie do oceny IHC lub FA.
  • Odsetek płuc ze zmianami jest bezpośrednio związany z ekonomicznym wpływem choroby.

Potwierdzanie ujemności zwierząt remontowych pod kątem obecności Mycoplasma hyopneumoniae

  • Należy upewnić się, że u zwierząt nie występuje kaszel
  • Losowe pobranie do najmniej 30 surowic od zwierząt remontowych i zbadanie ELISA.

Monitorowanie zwierząt remontowych pod kątem siewstwa przed wprowadzeniem do stada hodowlanego z wynikiem dodatnim lub ujemnym

  • Należy upewnić się, że u zwierząt nie występuje kaszel
  • Pobrać co najmniej 30 losowych próbek - wymazów z krtani od zwierząt remontowych. Połączyć próbki w grupy po 5 lub 6 i zbadanie za pomocą PCR.

Więcej informacji w "Podręczniku chorób"

Enzootyczne zapalenie płuc (EP)Głównym problemem związanym z infekcjami M. hyopneumoniae jest przewlekła choroba układu oddechowego. Ten patogen zwykle zwiększa nasilenie innych zakażeń, w tym grypy i PRRS.

Komentarze do artykułu

To miejsce jest przeznaczone do dyskusji między użytkownikami pig333.com a nie do zadawania pytań autorom artykułów
Skomentuj

Dostęp tylko dla użytkowników portalu 3trzy3. Zaloguj się aby dodać komentarz.

Powiązane produkty w sklepie

Sklep specjalizujący się w branży świń
Doradztwo i serwis techniczny
Ponad 120 marek i producentów

Powiązane artykuły