0
W celu oceny możliwości zastosowania nasienia enkapsulowanego w sztucznej inseminacji (AI), oceniono tę technikę na różnych etapach. Badano zachowanie dawek nasienia z ejakulatów, które zostały poddane enkapsulacji (E) i nieenkapsulowane (NE). (Sánchez-Sánchez et al., 2014).
W pierwszym badaniu porównano jakość obydwu typów dawek utrzymywanych w temperaturze 15 C przez pięć dni: nie zaobserwowano znaczących różnic w parametrach nasienia.
Jedną z najciekawszych właściwości nasienia enkapsulowanego jest możliwość sekwencyjnego wydzielania plemników z kapsułek. AAby ocenić przebieg tego procesu in vitro, próbki z obydwu grup ( E i NE) zostały poddane zmodyfikowanej technice swim - up ( test migracji nasienia). Sprawdzano koncentrację plemników osiągnięta w górnej części pojemnika, gdzie były trzymane próbki, przez 7 godzin w 37 C. Już w ciągu pierwszych kilku godzin zaobserwowano wyższą koncentrację plemników w grupie NE, podczas gdy w grupie E nie było ich prawie wcale. W grupie NE koncentracja była wysoka ale po pewnym czasie gwałtownie spadła, pozostając dość stabilna w 3 ostatnich godzinach i ciągle spadała. Jednak w grupie E na początku koncentracja plemników była znacznie mniejsza, potem jednak osiągnęła swój pik ( czego nie obserwowano w grupie NE), następnie stabilizację i wyższą koncentrację w ostatnich 3 godzinach doświadczenia w porównaniu do grupy NE.
W celu przeprowadzenia badania zachowania się dawek nasienia enkapsulowanego w drogach rodnych lochy, zsynchronizowano ruję w grupie 6 loch. Dawki nasienia zostały przygotowane z tego samego ejakulatu, i znów poddane enkapsulacji bądź tradycyjnie przygotowane. Dawki posiadały koncentrację 3 × 109 plemników a objętość wynosiła 95 ml na dawkę inseminacyjną w obydwu grupach. W grupie NE lochy otrzymały 2 dawki inseminacyjne na lochę, a w grupie E jedną (odpowiadającą drugiej dawce NE). Lochy zostały poddane eutanazji po 8 godzinach po czym oceniono obecność plemników w ich drogach rodnych (Obraz 1).
Obraz 1.- Obecność nasienia w drogach rodnych loch po 2 inseminacjach (nasienie NE) i po jednej (nasienie E) (Sánchez-Sánchez et al., 2014.)
 Inseminacje nasieniem nie enkapsulowanym (NE) 2 inseminacje na lochę |
 Inseminacje nasieniem enkapsulowanym (E)1 inseminacja na lochę |
||
| Strona lewa | Strona prawa | Strona lewa | Strona prawa |
U loch, które otrzymały dwie inseminacje nasieniem NE stwierdzono większa liczbę plemników w szyjce i okolicach trzonu macicy. Zaskakujące było to, że stwierdzono większa liczbę plemników w obydwu jajowodach u loch inseminowanych nasieniem enkapsulowanym (E), mimo, że zwierzęta otrzymały pojedynczą dawkę inseminacyjną.
Wyniki rozrodcze z inseminacji wykonywanymi tymi dwoma typami dawek nasienia różniły się między fermami (Tabela 1).
Tabela 1.- Wyniki inseminacji wykonanych nasieniem E i NE (Sánchez-Sánchez et al., 2014.)
| Typ AI | Liczba IA/lochę | Grupa | n | % Płodn. | Rozmiar miotu | |
| Ferma 1 | Tradycyjne AI | 2 | NE | 9 | 77.78 | 13.57 ± 2.64 |
| 2 | E | 10 | 90.00 | 14.89 ± 2.26 | ||
| Zaszyjkowe AI | 2 | NE | 10 | 100.00 | 12.90 ± 1.91 | |
| 2 | E | 7 | 85.71 | 13.17 ± 1.76 | ||
| Ferma 2 | Zaszyjkowe AI | 2 | NE | 64 | 85.94 | 11.63 ± 0.33 |
| 2 | E | 39 | 76.92 | 12.31 ± 0.47 | ||
| Ferma 3 | Tradycyjne AI P=0.056 |
2 | NE | 34 | 94.12 | 14.15a ± 0.61 |
| 1 | E | 40 | 82.50 | 12.48b ± 0.60 | ||
| Ferma 4 | Zaszyjkowe AI | 2 | NE | 16 | 87.50 | 13.36 ± 0.80 |
| 1 | E | 16 | 81.25 | 12.38 ± 0.73 | ||
| 2 | E | 16 | 81.25 | 13.46 ± 0.83 |
System stosowany w fermie 1 był tradycyjną inseminacją zaszyjkową, z 2 inseminacjami na lochę. Po zastosowaniu nasienia enkapsulowanego zaobserwowano poprawę liczebności miotu w obydwu typach inseminacji.
W fermie 2 stosowano tylko technikę inseminacji zaszyjkowej, z 2 dawkami na lochę. U loch inseminowanych nasieniem enkapsulowanym zaobserwowano poprawę liczebności miotów i spadek płodności.
Metoda stosowana na fermie 3 to tradycyjna inseminacja, z 2 inseminacjami przypadającymi na lochę w przypadku nasienia nieenkapsulowanego. W przypadku nasienia enkapsulowanego była to 1 inseminacja na lochę. Wyniki obydwu parametrów były niższe w przypadku pojedynczej inseminacji nasieniem enkapsulowanym.
Na fermie 4 stosowano inseminację zaszyjkową. Lochy inseminowane nasieniem enkapsulowanym były podzielone na dwie grupy, w zależności od liczby inseminacji (1 lub 2) przypadających na lochę. Zaobserwowano wzrost płodności loch inseminowanych nasieniem nieenkapsulowanym, a rozmiar miotu był mniejszy u loch inseminowanych pojedynczą dawką nasienia enkapsulowanego.
Wnioski
Enkapsulacja nasienia jest nową metodą, która może przyczynić się do lepszych wyników sztucznego zapładniania. Badania przeprowadzane in vitro nie wykazały żadnych znaczących różnic w parametrach nasienia w przypadku jego przechowywania w 15 C. Ponadto system enkapsulacji pozwala na sekwencyjne uwalnianie plemników z kapsułki w temperaturze 38 C.
W badaniach in vivo obserwuje się zwiększoną koncentrację nasienia w miejscu zapładniania w drogach rodnych samicy w przypadku jednokrotnej inseminacji nasieniem enkapsulowanym, w porównaniu do loch, które otrzymały 2 dawki nasienia nieenkapsulowanego. Wyniki reprodukcyjne otrzymane z różnych ferm były gorsze w przypadku loch inseminowanych jednokrotną dawką nasienia enkapsulowanego w porównaniu do dwukrotnej inseminacji nasieniem nieenkapsulowanym. Jednak w przypadku grup gdzie wykonano dwie inseminacje/ ruję rozmiar miotu był większy u loch inseminowanych nasieniem enkapsulowanym we wszystkich fermach.
