0
Wirus zespołu rozrodczo-oddechowego świń (PRRSV) nadal stanowi poważne wyzwanie dla produkcji trzody chlewnej w Stanach Zjednoczonych oraz w większości regionów świata. Skuteczny nadzór nad PRRSV w stadach świń jest trudny, zwłaszcza że wirus może utrzymywać się i krążyć przy bardzo niskiej częstości występowania. Chociaż prosięta w wieku odsadzania stanowią strategiczną subpopulację w nadzorze PRRSV w stadach zarodowych, niewiele typów próbek zostało dotychczas zwalidowanych i scharakteryzowanych pod kątem monitorowania tej grupy.
Metody: Celem niniejszego badania było porównanie częstości wykrywania RNA PRRSV w surowicy, wymazach z jamy ustnej, wymazach z nosa, wymazach krwi z żyły ucha oraz rodzinnych płynach ustnych pobranych od prosiąt w wieku odsadzania, a także ocena wpływu łączenia próbek na poziomie miotu na wykrywanie RNA PRRSV metodą ilościowej reakcji łańcuchowej polimerazy z odwrotną transkrypcją (RT-qPCR). Do badania wybrano trzy kwalifikujące się stada dodatnie w kierunku PRRSV w regionie środkowego zachodu USA. Łącznie pobrano próbki od 666 prosiąt z 55 miotów: surowicę, wymazy z nosa, wymazy z żyły ucha, wymazy z jamy ustnej oraz rodzinne płyny ustne. Testy RT-qPCR wykonano zarówno na próbkach indywidualnych, jak i na pulach wymazów tworzonych na poziomie miotu. Pule tworzono poprzez połączenie równych objętości każdego wymazu pobranego od prosiąt w obrębie danego miotu.
Wyniki: Dziewięćdziesiąt sześć prosiąt z 22 miotów było dodatnich w RT-qPCR na surowicy, 80 prosiąt z 15 miotów było dodatnich w wymazach z żyły ucha, 80 prosiąt z 17 miotów było dodatnich w wymazach z jamy ustnej, a 72 prosięta z 14 miotów było dodatnich w wymazach z nosa. Analiza współczynnika kappa Cohena wykazała niemal idealną zgodność pomiędzy wszystkimi parami porównań: wymazami z żyły ucha, wymazami z jamy ustnej, wymazami z nosa oraz surowicą. Wartości progowe cyklu (Ct) uzyskane w RT-qPCR z surowicy silnie przewidywały wykrycie PRRSV w próbkach wymazów. Istniało ≥95% prawdopodobieństwo wykrycia PRRSV w pulach wymazów z żyły ucha, wymazów z jamy ustnej i wymazów z nosa, gdy odsetek dodatnich próbek wymazów wynosił odpowiednio ≥23%, ≥27% oraz ≥26%.
Wnioski: Wymazy z żyły ucha, wymazy z nosa oraz wymazy z jamy ustnej mogą być stosowane jako próbki do nadzoru w kierunku wykrywania RNA PRRSV metodą RT-qPCR u prosiąt w wieku odsadzania. Minimalna liczba prosiąt, którą należy pobrać do badań z surowicy, wymazów z żyły ucha, wymazów z jamy ustnej i wymazów z nosa, aby z 95% pewnością wykryć ≥1 zakażone prosię przy częstości występowania PRRSV ≥10%, wynosi odpowiednio 30, 36, 36 i 40.
Osemeke OH, Cezar GA, Paiva RC, Moraes DCA, Machado IF, Magalhaes ES, Poeta Silva APS, Mil-Homens M, Peng L, Jayaraman S, Trevisan G, Silva GS, Gauger PC, Linhares DCL. Przekrojowa ocena wykrywania kwasu nukleinowego wirusa PRRSV metodą RT-qPCR w surowicy, wymazach z żyły ucha, wymazach z nosa oraz wymazach z jamy ustnej pobranych od prosiąt w wieku odsadzania w warunkach terenowych. Frontiers in Veterinary Science 2023; 10:1200376. doi: 10.3389/fvets.2023.1200376
